高效液相色谱仪作为实验室常用的分析型仪器，上手比较快，但有五个操作细节容易被忽略。即使是经验丰富的老分析员也会犯错误，导致一些仪器故障。 
1、高效液相色谱仪流动相不过滤
因为尘埃或其它杂质会磨损柱塞、密封圈和单向阀，因此流动相预先用0.2um或0.45um滤膜过滤后再使用。流动相的溶剂滤头要不定期清洗或更换。  
2、高效液相色谱仪使用后没有及时清洗
流动相中不应含有腐蚀性物质，含有缓冲盐的不应留在高效液相色谱仪系统内，由于蒸发或漏液，可能造成盐类晶体析出，会堵塞密封圈和单向阀。
3、高效液相色谱仪流动相走空
泵工作时要防止流动相走空，否则泵空转也会磨损柱塞杆和密封圈，造成漏液故障。
4、高效液相色谱仪没有流动相流出，有无压力
可能是泵内有空气，需要先排空，或使用注射器针筒抽出液体，还有可能性是密封圈磨损，需更换。
5、高效液相色谱仪压力和流量不稳
可能是有气泡，或者是单向阀内有异物，需要卸下单向阀，放在10%甲醇水，或者异丙醇超声后再使用。
作为高效液相色谱仪的操作人员，一定要认真学习液相的说明书，熟练掌握软件和硬件的操作，日常的维修，能够独立排除最基础的故障并且维修。这样才能延长高效液相色谱仪的使用寿命和工作品质。  

通用（深圳）仪器有限公司是一家专门从事液相色谱仪研发，设计，生产与销售的技术企业，具有强大的研发及工程技术实力。产品有液相色谱、离子色谱仪、原子荧光光谱仪、血药浓度分析仪，液相色谱的相关单元部件。想了解更多仪器设备，欢迎咨询

液相色谱柱日常使用和维护

　　色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。

　　①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。

　　②应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

　　③一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

　　④选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

　　⑤避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

　　⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。

　　⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过晚上或更长时间。

　　⑧色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

　　在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净）再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。

　　柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱（5~30mm），可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。

　　通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在pH2~9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。

　　每次工作完后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用，应每隔4~5天开机冲洗15分钟。

液相色谱柱 液相色谱柱 液相色谱柱日常使用和维护_液相色谱柱 　　液相色谱作为工业生产和实验研究过程中，运用较多的一种分析检测设备，其色谱柱柱效高低会对样品分析结果造成较大影响。因而如何提高液相色谱柱柱是实际工作运行过程中，不可避免的一大难题。在了解如何进行液相色谱柱柱效提高之前，对柱效值进行测算是需要了解的一大内容。 　　液相色谱柱柱效值并不足以大部分预测其色谱柱性能，一般色谱柱性能是指色谱柱用于分离样品的能力大小。而高柱效并不意味着能保证这种分离样品能力。以下根据网上资料，对如何提高液相色谱柱柱效进行如下简述： 　　1.通过降低液相色谱中移动相的流速,从而实现提高柱效，但此方法会导致延长设备的分析时长。
 　　2.通过减少液相色谱柱中的固定相的量，从而减小色谱柱中样品的负载量。
 　　3.减小液相色谱中固定相的颗粒度,但应注意减小颗粒度情况，避免因颗粒度过小导致降低色谱柱的渗透率。
 　　4.在选择液相色谱柱中的移动相时，一般建议选用低粘度的移动相，从而加快传质。但需要注意的是，低粘度移动相并不适用于多组份样品的分析。
 　　5.除了选择低粘度的移动相之外，可以通过适当调节色谱柱的柱温，从而降低移动相黏度。但与选用低粘度移动相相同，该方法会导致分离度会随之降低。
 　　6.对于停滞流动相的体积，一般建议尽量减小，从而达到加快移动相流速的目的，实现提高液相色谱柱柱效的目的。
 　　由于所得资料有限，因而上述内容并不全面，具体提高液相色谱柱柱效方法应根据实际情况咨询相关专业技术人员进行操作。